उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी क्या है?
उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (संक्षेप में एचपीएलसी) एक विश्लेषणात्मक तकनीक है जिसका व्यापक रूप से रसायन विज्ञान, जीव विज्ञान, चिकित्सा और अन्य क्षेत्रों में उपयोग किया जाता है। यह मिश्रण में प्रत्येक घटक के पृथक्करण, पहचान और मात्रात्मक विश्लेषण को प्राप्त करने के लिए स्थिर चरण के माध्यम से तरल मोबाइल चरण को पारित करने के लिए उच्च दबाव का उपयोग करता है। हाल के वर्षों में, विज्ञान और प्रौद्योगिकी की प्रगति के साथ, एचपीएलसी प्रौद्योगिकी ने दवा अनुसंधान और विकास, पर्यावरण निगरानी, खाद्य सुरक्षा और अन्य क्षेत्रों में तेजी से महत्वपूर्ण भूमिका निभाई है।
1. उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी का कार्य सिद्धांत

उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी का मुख्य सिद्धांत स्थिर चरण और मोबाइल चरण के बीच नमूने में प्रत्येक घटक के वितरण अंतर पर आधारित है। जब किसी नमूने को क्रोमैटोग्राफी प्रणाली में इंजेक्ट किया जाता है, तो मोबाइल चरण (आमतौर पर एक विलायक) उच्च दबाव पर नमूने को स्थिर चरण (जैसे सिलिका जेल या पॉलिमर पैकिंग) के माध्यम से धकेलता है। स्थिर चरण के साथ अलग-अलग इंटरैक्शन के कारण अलग-अलग घटक अलग-अलग गति से क्रोमैटोग्राफ़िक कॉलम से गुजरते हैं, और अंततः अलग हो जाते हैं।
| घटक | समारोह |
|---|---|
| मोबाइल चरण | कॉलम के माध्यम से नमूना ले जाना |
| स्थिर चरण | पृथक्करण प्राप्त करने के लिए नमूना घटकों के साथ इंटरैक्ट करता है |
| उच्च दबाव पंप | स्थिर मोबाइल चरण प्रवाह दर प्रदान करता है |
| डिटेक्टर | अलग हुए घटकों का पता लगाना |
2. उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी का वर्गीकरण
पृथक्करण तंत्र के आधार पर, एचपीएलसी को निम्नलिखित सामान्य प्रकारों में विभाजित किया जा सकता है:
| प्रकार | पृथक्करण तंत्र | अनुप्रयोग परिदृश्य |
|---|---|---|
| उलट चरण क्रोमैटोग्राफी | हाइड्रोफोबिक इंटरैक्शन पर आधारित | औषधि विश्लेषण, पर्यावरण निगरानी |
| सामान्य चरण क्रोमैटोग्राफी | ध्रुवीय अंतःक्रियाओं पर आधारित | प्राकृतिक उत्पाद अलगाव |
| आयन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी | चार्ज इंटरेक्शन पर आधारित | प्रोटीन और न्यूक्लिक एसिड विश्लेषण |
| आकार अपवर्जन क्रोमैटोग्राफी | आणविक आकार के आधार पर | पॉलिमर आणविक भार निर्धारण |
3. उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी के अनुप्रयोग क्षेत्र
एचपीएलसी तकनीक का उपयोग इसकी उच्च संवेदनशीलता, उच्च रिज़ॉल्यूशन और उच्च थ्रूपुट के कारण निम्नलिखित क्षेत्रों में व्यापक रूप से किया जाता है:
1.औषधि अनुसंधान एवं विकास और गुणवत्ता नियंत्रण: एचपीएलसी सक्रिय फार्मास्युटिकल अवयवों के विश्लेषण, अशुद्धियों का पता लगाने और फार्माकोकाइनेटिक अध्ययन के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण है।
2.खाद्य सुरक्षा: भोजन में योजक, कीटनाशक अवशेषों और हानिकारक पदार्थों का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है।
3.पर्यावरण निगरानी: पानी, मिट्टी और हवा में प्रदूषकों का विश्लेषण करें, जैसे पॉलीसाइक्लिक एरोमैटिक हाइड्रोकार्बन, भारी धातुएं, आदि।
4.जीवन विज्ञान अनुसंधान: प्रोटिओमिक्स, मेटाबोलॉमिक्स और अन्य क्षेत्रों में बायोमोलेक्यूल्स को अलग करने और पहचानने के लिए उपयोग किया जाता है।
4. उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी के लाभ और सीमाएं
| लाभ | सीमाएँ |
|---|---|
| उच्च पृथक्करण दक्षता | उपकरण की लागत अधिक है |
| उच्च संवेदनशीलता | पेशेवर ऑपरेटरों की आवश्यकता है |
| अनुप्रयोगों की विस्तृत श्रृंखला | कुछ नमूनों का पूर्व-प्रसंस्करण जटिल है |
| स्वचालन की उच्च डिग्री | मोबाइल चरण की खपत बड़ी है |
5. उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी का विकास रुझान
विज्ञान और प्रौद्योगिकी की प्रगति के साथ, एचपीएलसी प्रौद्योगिकी भी लगातार विकसित और सुधार रही है। हाल के वर्षों में मुख्य रुझान निम्नलिखित हैं:
1.अल्ट्रा-उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (यूएचपीएलसी): पृथक्करण दक्षता और गति को और बेहतर बनाने के लिए छोटे कण आकार के फिलर्स और उच्च दबाव का उपयोग करें।
2.हाइफ़नेटेड तकनीक: जैसे एचपीएलसी-एमएस (मास स्पेक्ट्रोमेट्री), जो विश्लेषण स्तर में सुधार के लिए क्रोमैटोग्राफी की पृथक्करण क्षमता और मास स्पेक्ट्रोमेट्री की पहचान क्षमता को जोड़ती है।
3.हरित रसायन: कार्बनिक विलायकों के उपयोग को कम करने के लिए अधिक पर्यावरण अनुकूल मोबाइल चरणों और स्तंभों का विकास करें।
4.आर्टिफिशियल इंटेलिजेंस और बिग डेटा: विश्लेषण दक्षता और सटीकता में सुधार के लिए एल्गोरिदम के माध्यम से क्रोमैटोग्राफ़िक स्थितियों को अनुकूलित करें।
उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी आधुनिक विश्लेषणात्मक रसायन विज्ञान में एक महत्वपूर्ण उपकरण है, और इसके अनुप्रयोग का दायरा और तकनीकी स्तर अभी भी विस्तार और सुधार कर रहा है। भविष्य में, नई सामग्रियों और नई प्रौद्योगिकियों के आगमन के साथ, एचपीएलसी अधिक क्षेत्रों में महत्वपूर्ण भूमिका निभाएगा।
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